講述色譜柱的故障診斷與維護(ppt 33頁)

目錄：
I. 常見問題， 現象及排除方案
- 基線漂移/噪音
- 峰型
- 壓力變化
- 保留漂移
II. 日常維護/ 良好的實踐
- 在線裝置
- 樣品製備
- 操作的限製
III. 再生/維修已損壞的色譜柱
-物理方法
-化學方法

基線漂移
可能的原因：
? 梯度洗脫
? 溫度不穩定 (示差檢測器）
? 流動相中有汙染物
? 柱中的流動相沒有平衡
? 體係中有汙染物流出
壓力
I. 不進樣時柱壓連續升高
- 泵密封墊
- 流動相有顆粒
- 流動相溶解性
- 流動相的不穩定性 (聚合)
- 形成柱死體積 (與使用條件有關)
II. 進樣時壓力升高
- 樣品有顆粒
- 樣品在流動相中不溶
- 樣品組分與固定相不兼容
保留值漂移
I. 所有峰都向低保留值方向漂移（酸、堿、中性化合物）
- 鍵合相流失
- 流動相不穩定 (可能性較小)
- 溶劑輸送係統 (流速變化)
II. 所有峰都向高保留值方向漂移
- 在水/有機溶劑的混合體係中，有機溶劑含量減少
- 柱改變 (可能性較小)
- 溶劑輸送係統 (流速變化)
III. 離子型化合物的色譜峰的保留值漂移
-流動相中揮發性組分損失 (離子強度, pH 漂移)
- 柱改變 (鍵合相或汙染)
I. 與流動相有關的問題
- 使用新鮮的流動相
?pH
?電導
?色譜性能測試
II. 與色譜柱有關的問題
- 測試新柱
- 用標準的測試混合樣測試新柱
- “清洗” 色譜柱後再測
- 考慮樣品基質與使用條件對柱穩定性的影響
色譜柱的修複與再生 --
物理性阻塞
在安裝柱前後測試壓力差
如果柱壓力太高，反裝色譜柱，並用10-20倍柱體積的流動相衝洗色譜柱，監測壓力變化
若出現沉澱 (如：蛋白凝聚、細胞物、聚合物) 設法用相應的可溶性溶劑，如 0.1% TFA / 80% 乙腈, 6M 鹽酸胍, THF, HFIP
若仍無效，應考慮更換過濾片

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